La version DIS de la norme ISO 11737-3 "Stérilisation des produits de santé – Méthodes microbiologiques - Partie 3 : Essais des endotoxines bactériennes" vient d’être publiée. Albhades décrypte ici les atouts principaux de cette nouvelle norme.

Carole Lemaitre (source Albhades).

Par Carole Lemaitre, Directrice technique biologie chez Albhades

La série de normes ISO 11737, qui décrit les méthodes microbiologiques associées à la stérilisation des produits de santé, se déclinera dorénavant en trois volets :

• La norme ISO 11737-1:2018/AMD1:2021 spécifie les exigences et fournit des recommandations relatives au dénombrement et à la caractérisation microbienne de la population de microorganismes viables sur ou dans un produit de santé.
• La norme ISO 11737-2:2019 décrit les essais à réaliser pour contrôler la stérilité des dispositifs médicaux qui ont été exposés à un traitement par un agent stérilisant.
• Enfin, la norme ISO 11737-3 décrit les critères généraux à appliquer pour la détermination des endotoxines bactériennes dans les produits de santé, les composants ou les matières premières, en utilisant les méthodes d’essais des endotoxines bactériennes (EEB) à l’aide des réactifs de lysat d’amébocyte.

Pourquoi détecter les EEB ?

Les pyrogènes sont des substances susceptibles de provoquer de la fièvre. Leur recherche est nécessaire pour le contrôle de nombreux produits de santé devant être non pyrogènes en raison de leur usage ou de la mention "non pyrogène" sur l’étiquette. Les contaminants pyrogènes prédominants sont les endotoxines bactériennes qui sont des composants de la membrane cellulaire des bactéries Gram-négatif. Les endotoxines sont omniprésentes dans la nature, stables et suffisamment petites pour passer à travers les filtres de stérilisation conventionnels. Ainsi, un produit stérile n'est pas forcément exempt d’endotoxines.

Les "plus" de la norme ISO 11737-3

Enfin une norme internationale spécifique aux dispositifs médicaux qui traite du dosage des endotoxines bactériennes (EEB) !

La norme ISO 11737-3 décrit l’essai des endotoxines bactériennes sur les produits de santé non pyrogènes. Elle évoque les principes des méthodes pour l’EEB, la notion de limite d’endotoxines en fonction des produits et précise comment définir la dilution maximale significative (DMS) avec des exemples concrets de calcul de volume d’extraction total en fonction de la limite réglementaire et du produit. La norme insiste sur l’importance de la validation de la méthode d’essai afin de s’assurer de l’absence d’interférence (inhibition ou activation) de l’essai, et sur le maintien de la méthode validée (ré-évaluation des changements du produit ou du procédé de fabrication, susceptibles d’apporter un impact sur l’essai).

La norme ISO 11737-3 propose des recommandations pour la sélection des unités de produit, en recommandant un plan d’échantillonnage couramment utilisé (nombre d’unités, sélection des échantillons, incluant des échantillons en cours de procédé). Elle apporte des précisions quant à la représentativité de l’échantillon soumis à l’essai, qui doit inclure dans son emballage tous les matériaux qui entreraient normalement en contact direct avec le produit fini. Elle formule des recommandations sur l’utilisation des techniques pour les contrôles de routine et sur l’interprétation des résultats d’essai (exploitation de tendances).

La norme ISO 11737-3 précise que l’essai des endotoxines bactériennes est réalisé sur les produits finis pour chaque lot. Elle ouvre également la possibilité à une alternative aux essais par lot, basée sur une évaluation des risques (évaluation de la gravité et de la probabilité d’une réaction pyrogène). L’alternative aux essais par lot peut être définie après avoir identifié les étapes clés du procédé ou des points de contrôle, et établi une évaluation des risques visant à démontrer que le procédé est approprié à une telle approche. Dans ce cadre, si l’échantillon représentant d’un plan d’échantillonnage alternatif à l’essai par lot, donne un résultat inacceptable, une évaluation du risque des produits représentés par le plan d’échantillonnage devra être étayée.

Cette norme ISO 11737-3 représente un recueil d’informations et de recommandations indispensables à l’usage des industriels sur le sujet des endotoxines.

L’essai EEB dans la maîtrise de l’environnement de fabrication

Les applications du test EEB sont diverses et peuvent aider à une meilleure maîtrise de l’environnement de fabrication. Comment ? La sensibilité de la détection des endotoxines permet de mettre en évidence une contamination bactérienne de l’eau de process (70 % par des bactéries Gram-négatif) jusqu’à un mois avant la visualisation des bactéries sur culture. Il est ainsi possible d’agir sur la boucle d’eau avant d’atteindre une situation devenue ingérable en raison des développements de biofilms bactériens.

www.albhades.com